制作食用菌菌种时杂菌污染的原因

银耳灭菌设备是用来对银耳的各级菌种培养基、栽培料袋(瓶)及有关器具等进行灭菌的装置,银耳种植应当选用什么灭菌设备?银耳灭菌设备可分为高压灭菌锅和常压灭菌灶两大类。

食用菌菌种在培养过程中均会不同程度的发生诸如绿霉、青霉、曲霉、根霉、毛霉以及细菌等杂菌污染,高温季节尤为严重。生产过程中由于杂菌的侵害,往往会引起减产甚至绝收。因此,寻找杂菌污染的原因,对于提高栽培的成功率和提高经济效益具有重要的意义。正常情况下,二级菌种和三级菌种的污染率在5%以下,如果超出了这一范围,就需要我们查找原因了。造成菌种污染的原因如下:
灭菌不彻底:培养料灭菌不彻底会造成杂菌污染,一般3-5天即可出现污染现象。而灭菌不彻底也是由于下列几个原因引起的:
①霉菌操作不当:一般杂菌的菌丝体与孢子经过常压100℃、6-8小时或121℃、0.5-2小时均能杀死。目前食用菌培养料往往采用常压灭菌法或高压灭菌法。常压灭菌对谷粒、粪草等材料的灭菌难度较大,不容易完全达到灭菌的效果;而高压灭菌法效果则要好得多。采用高压灭菌时,关键是把锅内冷空气排尽,否则,锅内不能达到饱和的蒸汽压,灭菌的温度也达不到要求。采用常压灭菌时,灭菌仓的周围最好砌成圆形,以便灶内升温均匀,灶顶砌成圆拱形,这样冷凝水沿四壁下流而不会打湿菌种瓶。另外蒸汽不足、温度不高等也是常压灭菌不彻底的因素。
②培养料性质的影响:制种所需材料的种类、培养料中的含菌量、含水量以及酸碱度等都能影响灭菌效果。灭菌时,要根据培养料配方的不同,选择相应的灭菌时间。选用的培养料一定要新鲜无霉变。从培养料灭菌前微生物含量来看,微生物数量越高则灭菌时间越长,反之则短,所以培养料配制完毕后必须及时灭菌,装袋后的菌种千万不要过夜后再上锅灭菌,以免微生物大量繁殖,导致料内的含菌量升高,并且会造成料中营养损失。水的热传导性能比木屑、粪草等固体要强,如果培养料内水分均匀适宜,则灭菌效果好。培养料中应避免出现”夹心料”。灭菌锅内的蒸汽对夹心料的穿透能力较弱,容易出现灭菌死角,达不到灭菌的目的。另外,培养料的酸碱度也影响灭菌的效果,偏酸的培养料比中性和偏碱性的灭菌时间要短。
③菌种瓶在灭菌锅内的堆放形式可影响灭菌的效果。在排放时要留有一定的空隙,以便蒸汽的流通和升温。对菌种袋装的培养料灭菌时,由于塑料袋受热后容易变形变软,如装料不紧,叠压堆放时则菌袋之间的空隙会减少,影响灭菌的效果。
④菌种瓶或菌种袋的影响:制种时一般选择菌种瓶或菌种袋。塑料袋传热速度快,而玻璃瓶则传热速度慢,在相同培养料,使用相同的灭菌方法时,瓶装料要比袋装料灭菌时间稍长一些。另外,个别容器密封不严或细小破损,也可以导致杂菌的污染。
接种操作不规范:食用菌接种过程需要严格的无菌操作,如操作不规范则极易造成培养料的杂菌污染。污染的杂菌一般是接种室空气中杂菌、菌袋表面的杂菌以及接种人员的体表杂菌等。操作不规范引起培养料污染的特点,是杂菌在培养料表面生长,一般发生在菌袋开口处以及接种处。因此必须要严格遵守无菌操作规程,接种室要用”菌室专用消毒王”进行严格的消毒处理。
菌种带杂菌:用于扩大培养的原种本身必须是纯菌,这样才能保证菌种的单一性。如果菌种本身不纯,可造成批量污染,生产中的一批菌种中,集中在一起的菌种都出现污染,而且污染的部位在菌种块处,污染出现较早,接种3-5天即可出现。因此我们在制种时应尽量采用生活力强、菌龄适宜、抗逆性强的优良菌种原种。
培养室不洁净:培养料不洁净、空气不流通、室内潮湿,也可感染杂菌。这种情况下污染率相对较低,但随着培养时间的延长,污染率会逐渐增加。大量污染出现比较晚,一般在接种10天后出现。

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1、高压灭菌锅

是利用高温、高压蒸汽来实施灭菌的装置。常见的类型主要有手提式、立式及卧式3种。

a.手提式高压灭菌锅

其容量较小,仅适用于试管培养基、三角瓶或平皿培养基、无菌水、少量原种培养基及一些小型器具的灭菌,通常用于制作母种和少量原种等。

b.立式高压灭茵锅

这类锅型号较多、容量较大,可用于菌种瓶、罐头瓶及袋装培养基的灭菌,主要用来生产原种和栽培种等。

c.卧式高压灭茵锅

这类锅容量大,灭菌彻底,每次可装200~800只甚至更多菌种瓶或料袋(规格17厘米×34厘米),可用于原种培养基、栽培种培养基以及栽培料的灭菌,适宜于大规模生产。

高压灭菌锅应向持有生产许可证的专门生产厂家购买,否则极不安全,易出爆炸事故。平时要注意灭菌锅的维护与保养,经常检查压力表、温度表、安全阀是否正常,定期送有关部门检验校正。使用前应仔细阅读产品使用说明书,了解锅的构造和操作步骤。一般灭菌锅的操作步骤如下。

①加水:使用前向锅内加水至规定水位。

②装锅:将待灭菌物品装入锅内,但不得装入过满、过紧,瓶(袋)要整齐排放,相互间应留有适当间隙,以利蒸汽流通,确保灭菌效果。

③盖好锅盖:将锅盖对角的旋钮用力均匀地旋紧,要求以不漏气为原则。

④加热升温:烧水开始,立即打开排气阀,让锅内的冷气徐徐排出。当排出的气体为直线上升的蒸汽时,可将排气阀关闭。当压力表指针上升到50千帕时,再排气1次,让压力表指针回到“0”后关闭排气阀。如果锅内的冷空气未排尽,即使达到规定的压力也达不到相应的灭菌温度,从而不能彻底灭菌。

⑤升压保压:冷空气排尽,关上排气阀后,锅内的压力及温度不断上升。当压力达到所需数值后,按灭菌要求保持此压力一定时间,直至灭菌结束。

⑥降压排气:灭菌结束后,停止加热,使其自然冷却,待压力表指针降至“0”时,要打开放气阀排气。如排气过早,锅内压力骤然下降,易致棉塞冲出和吸潮,或玻璃瓶炸裂脱底,或料袋膨胀变形及崩裂;排气过迟,则产生锅内倒吸气,易将冷气吸入料袋(瓶)内,造成灭菌失败。

⑦出锅:开锅前先使锅盖松动,借助锅中余热将棉塞等吸水物品烘干。待10分钟左右,就可开盖,取出已灭菌的物品。

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